Waters液相色譜柱采用可靠的高質(zhì)量制造工藝,可確?,F在開(kāi)發(fā)的方法在將來(lái)也能提供相同的可重現結果。色譜是-種分離分析手段,分離是核心,因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統的心臟。
色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,壓力不高于70Kg/cm2時(shí),也可采用厚壁玻璃或石英管,管內壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應,不銹鋼柱內壁多經(jīng)過(guò)拋光。
選擇Waters液相色譜柱時(shí)應考慮不同色譜柱參數的影響,以下內容對色譜柱的參數進(jìn)行分析:
色譜柱尺寸:
1、較長(cháng)的色譜柱組分保留較強,運行時(shí)間較長(cháng),柱效更高,分離度效果更好。在實(shí)際工作中應綜合衡量運行時(shí)間和柱效,選擇長(cháng)度適宜的色譜柱。例如含量測定、溶出檢測對于分離的要求較低,可選用較短的色譜柱,減少運行時(shí)間;有關(guān)物質(zhì)一般選擇較長(cháng)的色譜柱,提高分離效果。
2、內徑小的色譜柱靈敏度較高,峰型更窄,但是載樣量較小。如果載樣量滿(mǎn)足要求,需要更高更尖銳的峰提高靈敏度,可以選擇更小內徑。但是如果進(jìn)樣量超過(guò)了柱載樣量,色譜峰將極大變寬。所以應在靈敏度和載樣量之間綜合衡量。
3、粒徑小的色譜柱分離度較好,色譜柱壓力更大。如果5μm粒徑的色譜柱分離度稍有不足,則同型號3μm色譜柱的分離度一般會(huì )提供令人滿(mǎn)意的選擇性。
如果選擇較小尺寸的色譜柱,應衡量柱外死體積對柱效的影響,柱外死體積包括連接管線(xiàn)、進(jìn)樣體積、色譜柱接頭與色譜柱連接處的空隙等。所以一般超高效液相使用的色譜柱不適用于常規液相儀。小規格色譜柱最好使用同一品牌的儀器,減少連接處空隙引入的死體積。題外話(huà):島津、安捷倫、waters之間儀器管線(xiàn)接頭和色譜柱不匹配,儀器和色譜柱品牌不一致必然引入較大連接空隙,應注意這方面的影響。