Waters液相色譜柱在使用前,先進(jìn)行柱的性能測試,并將結果保存起來(lái),作為今后評價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測試時(shí)要按照色譜柱出廠(chǎng)報告中的條件進(jìn)行,只有這樣,測得的結果才有可比性。
本產(chǎn)品可適用范圍廣,從極性化合物到非極性化合物都可獲得良好的分離,在碳水化合物如低聚糖、苷類(lèi)糖化學(xué),生藥學(xué)和天然產(chǎn)物化學(xué),生物物質(zhì)如多肽、蛋白、核酸等多個(gè)領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。
Waters液相色譜柱選擇的條件是什么?可以從下面這些方面考慮。
1、填料基質(zhì)
1)硅膠基質(zhì):純度高本錢(qián)低,強度大,化學(xué)修飾輕易,但pH值范圍有限。大多硅膠基質(zhì)填料在pH2-8之間穩定,但經(jīng)過(guò)特殊修飾的硅膠鍵合相可以穩定在pH1.5-10。
2)聚合物基質(zhì):應用pH值范圍寬,溫度穩定(高溫可以達到80度以上),機械強度小。
2、顆粒外形
大多現代HPLC填料都是球形顆粒,但有時(shí)是不規則的顆粒。球形顆粒提供較低的柱壓、較高的柱效和穩定性以及較長(cháng)的柱壽命在使用高粘度的活動(dòng)相時(shí);不規則顆粒有較大比表面積和相對低廉的價(jià)格。
3、顆粒粒徑
粒徑越小柱效越高、分離度越高,但同時(shí)會(huì )導致較高柱壓降。選擇1.5-3μm的填料以解決一些復雜樣品,UPLC可以使用1.5μm的填料;另外10μm或更大粒徑的填料用作半制備或制備柱。
4、含碳量
含碳量指的是硅膠表面鍵合相的比例,與比表面積和鍵合覆蓋度等有關(guān)。高含碳量進(jìn)步柱容量、分辨率及分析時(shí)間,用于要求高分離度的復雜樣品;低含碳量分析時(shí)間短、展現不同的選擇性,用于快速分析簡(jiǎn)單樣品及需要高含水活動(dòng)相條件的樣品。一般C18的含碳量在7-19%不等。
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