液相保護柱是用來(lái)過(guò)濾樣品和流動(dòng)相中的雜質(zhì),保護色譜柱,延長(cháng)色譜柱的使用壽命的。它的安裝位置通常在進(jìn)樣器之后,色譜柱前端。保護柱組件結合了不銹鋼的強度和PEEK預填柱芯的方便和高效。無(wú)需使用工具,將一小段與柱填料相同的保護柱置入進(jìn)樣閥和色譜柱之間,這將延長(cháng)色譜柱的壽命,保證重現性結果。
液相保護柱在選擇時(shí)分為兩種:
一種是獨立式卡套保護柱??ㄌ變确庞兄?,柱芯內含有填料,柱芯可以更換,而柱芯是根據色譜柱的類(lèi)型來(lái)選擇的。
另一種是一體化卡套保護柱。這是一種特殊的色譜分析柱構造,色譜柱前端是一體化的,可以直接打開(kāi)保護柱卡套。這種保護柱帶來(lái)的死體積較小,但是分析柱選擇時(shí)的成本較普通分析柱更高。
值得注意的是,保護柱的柱芯除了需要根據色譜柱的類(lèi)型進(jìn)行選擇,在第一次使用時(shí)是沒(méi)有方向的,但初次使用后就有了方向,不能再調換方向使用。
任何HPLC或UHPLC柱都是有試用壽命的。正確使用和維護色譜柱可以延長(cháng)其使用壽命,有利于該方法的經(jīng)濟性。重要的是遵循*的色譜慣例,如適當的樣品制備(樣品應通過(guò)0.45µm的膜過(guò)濾器進(jìn)行高效液相色譜過(guò)濾,通過(guò)0.22µm的過(guò)濾器進(jìn)行超高效液相色譜過(guò)濾);流動(dòng)相的適當質(zhì)量/純度(例如,用于等度模式的等度級溶劑,用于梯度洗脫的梯度級溶劑);過(guò)濾流動(dòng)相,發(fā)展良好的方法,具有足夠強的洗脫能力,以盡量減少非特定的吸附;與所選色譜柱兼容的溫度、pH值和最大背壓范圍。另外值得一提的是,總進(jìn)樣次數與進(jìn)樣體積成反比,例如,如果每次進(jìn)樣10µL樣品,這導致柱壽命為5000次進(jìn)樣,則每次進(jìn)樣100µL的樣品負載增加通常會(huì )將柱壽命縮短至約500次進(jìn)樣。